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培訓首頁 | 成長部落格 | 教育論壇 | 資源互動平臺 作業九： 作者： 董亞昆 （高中生物 內蒙古烏蘭察布涼城生物一班 ） 評論數/瀏覽數： 6 / 79 發表日期： 2009-07-29 12：23：33 課題：分解纖維素的微生物的分離教學目標：（一）知識與技能簡述纖維素酶的種類及作用，從土壤中分離出分解纖維素的微生物；掌握從土壤中分離某種特定微生物的操作技術（二）過程與方法分析分離分解纖維素的微生物的實驗流程，弄懂實驗操作的原理（三）情感、態度與價值觀領悟科學探究的方法，發展科學思維和創新能力教學重點：從土壤中分離分解纖維素的微生物教學難點：從土壤中分離分解纖維素的微生物教學過程（一）引入新課上節課我們探討學習了土壤中尿素分解菌的分離與計數，這節課我們以纖維素分解菌的分離與純化為例，鞏固加深對這方面技術的理解和掌握。（二）進行新課1．基礎知識活動1：閱讀“纖維素與纖維素酶”，回答下列問題：1．1纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是含量最豐富的多糖類物質。纖維素能被土壤中某些微生物分解利用，這是因為它們能夠產生纖維素酶。延伸：草食性動物是怎樣消化食物中纖維素的？腸胃中的共生物生物。1．2棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產物。纖維素的分解需要在纖維素酶的催化作用下完成，請完成下列過程：纖維素纖維二糖葡萄糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶

〖思考1〗實驗分析：投影的小實驗是如何構成對照的？在一支試管中新增纖維素酶，另一支試管不新增纖維素酶；儘管醋酸－醋酸鈉緩衝液用量不同，但都能維持相同的pH。〖思考2〗1個酶活力單位是指在溫度為 25 ℃，其它反應條件最適宜情況下，在 1 min內轉化 1mmol 的底物所需要的酶量。活動2：閱讀“纖維素分解菌的篩選”，回答下列問題：1．3篩選纖維素分解菌的方法是剛果紅染色法。該方法可以透過顏色反應直接篩選。2．4其原理是：剛果紅可以與纖維素形成紅色複合物，當纖維素被纖維素酶分解後，紅色複合物無法形成，出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以透過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。2．實驗設計活動3：完成實驗方案流程圖，討論回答問題：選擇培養梯度稀釋塗布到鑑別纖維素分解菌培養基上微生物培養土壤取樣挑選產生透明圈的菌落純化培養

〖思考3〗實驗流程中“選擇培養”的培養基型別是什麼？該培養的目的是什麼？液體選擇培養基。其目的是使纖維素分解菌增殖，含量增多。〖思考4〗本實驗流程與尿素分解菌的分離實驗流程有哪些異同？尿素分解菌的分離實驗流程是將土樣製成的菌懸液直接塗布在選擇培養基上；本課題透過選擇培養使細菌增殖後，再塗布在鑑別培養基上。其它操作基本基本共同。活動4：閱讀投影資料一“土壤取樣”，回答下列問題：2．1纖維素分解菌大多分佈在富含纖維素的環境中。2．2為什麼要在富含纖維素的環境中尋找纖維素分解菌？生物適應一定環境，環境對生物具有選擇作用，只有在纖維素含量豐富的環境中纖維素分解菌的含量才會高於其它普通環境，從而提高獲得目的微生物的機率。2．3將濾紙埋在土壤中有什麼作用？你認為濾紙應該埋進土壤多深？人工設定適宜環境，使纖維素分解菌相對聚集。將紙埋於深約10cm的腐殖土壤中。活動5：閱讀投影資料二“選擇培養基”，回答以下三個問題：2．4纖維素分解菌選擇培養基屬於液體培養基，原因是沒有新增瓊脂成分。2．5培養基選擇作用機制是以纖維素粉為唯一碳源，只有纖維素分解菌才能生存。2．6若設定一個對照實驗說明選擇培養的作用，應控制的變數是將纖維素粉改為葡萄糖。活動5：閱讀投影資料三“剛果紅染色法”，填表比較兩種染色法的各自的優缺點：染色法優點缺點方法一顏色反應基本上是纖維素分解菌的作用操作繁瑣剛果紅會使菌落之間發生混雜方法二操作簡便不存在菌落混雜問題產生澱粉酶的微生物也產生模糊透明圈，有些微生物能降解色素，形成明顯的透明圈。

〖思考5〗為什麼選擇培養能夠“濃縮”所需的微生物？在選擇培養條件下，可使能夠適應這種營養條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應這種營養條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“濃縮”的作用。3．結果分析與評價活動6：閱讀“課題延伸”，回答：3．1為了確定分離得到的是纖維素分解菌，還需要進行 發酵產纖維素酶 實驗，纖維素酶的發酵方法有 液體 發酵和 固體 發酵。3．2纖維素酶測定方法是對纖維素酶分解濾紙等纖維素所產生的 葡萄糖 含量進行定量測定。 （三）課堂總結、點評纖維素分解微生物的分離纖維素酶種類、作用、最適pH、催化活力剛果紅染色篩選原理實驗設計土壤取樣選擇培養塗布培養純化培養前置染色法後置染色法富含纖維素土壤增大分解菌含量染色鑑別分離出分解菌

（四）例項探究例1．有關穀氨酸發酵的敘述中正確的是A