|撰文:莫北

我們拍攝的顯微鏡(如熒光顯微鏡,電鏡等)照片,一般會用顯微鏡配套的拍攝軟體在照片的固定位置(如右下角)加上標尺(Scale bar)。

但在我們展示的時候,往往需要將照片進行裁剪和排版,照片右下角的標尺往往會被裁剪掉。

那麼,

這時候如何給照片再加上標尺呢?甚至如何自由設定標尺的大小、實現下圖這般的標尺長度“整齊劃一”?

生信工具教程 | 如何用ImageJ自由調整顯微照片的標尺?

PNAS,2014

在《如何手動給顯微鏡照片加標尺?》一文已經介紹過如何使用Photoshop手動新增標尺,接下來為大家介紹一種更簡單的方法。

這次我們用到的軟體是ImageJ,軟體教程、安裝包與範例照片連結:

https://www。

omicshare。com/forum/thr

ead-2783-1-1。html

首先,透過File/Open開啟需要處理的圖片,然後使用放大工具(工具欄第10個,快捷鍵:Ctrl+“+”放大,Ctrl+“-”縮小)放大圖片,重點是放大標尺區域,便於操作。

接下來是

設定標尺的真實單位

,也就是將圖片的畫素尺寸(pixels)換算為實際的物理尺寸,如這裡的微米。

方法是根據照片中的標尺,用直線工具畫一條與標尺等長的線段,然後透過Analyze/Set Scale,設定換算關係,(如果選擇“Global“,接下來的照片都以此標準進行換算,直到關閉軟體),點OK 完成設定。注意,雖然單位輸入的是“um”,但imageJ會自動轉換為“µm”,這一點非常人性化!

生信工具教程 | 如何用ImageJ自由調整顯微照片的標尺?

接下來使用矩形工具框選保留區域(同時按下Shift鍵繪製正方形選區),就可以透過Image/Crop隨意裁剪照片啦,如下,就可將顯微照片裁剪成方形的。

生信工具教程 | 如何用ImageJ自由調整顯微照片的標尺?

完成裁剪後,接著透過Analyze/Tools/Scale Bar為裁剪後的照片新增標尺。

生信工具教程 | 如何用ImageJ自由調整顯微照片的標尺?

在彈出的Scale bar視窗中,你可以設定標尺的實際大小、粗細、字型的大小、顏色、位置、樣式等,具體如下。

生信工具教程 | 如何用ImageJ自由調整顯微照片的標尺?

其實,標尺的新增位置不僅僅是Location選項中的4種,你也可以在照片的任意位置新增標尺。

你可以在任意位置繪製矩形選區,Location選擇At Selection,然後將標尺新增的選區中,具體方法如下。

生信工具教程 | 如何用ImageJ自由調整顯微照片的標尺?

最後,透過File/Save as匯出所需格式的照片即可。

生信工具教程 | 如何用ImageJ自由調整顯微照片的標尺?

以上就是使用ImageJ為顯微照片新增的標尺的方法,是不是非常簡單呢?

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參考文獻

Yang L , Qin L , Liu G , et al。 Myosins XI modulate host cellular responses and penetration resistance to fungal pathogens[J]。 Proceedings of the National Academy of ences of the United States of America, 2014, 111(38):13996-4001。