izzzs148852020-03-06 10:47:11

首先，EST序列的測序，得到該基因的EST片段其次，生物資訊學，用Go或者KEGG，分析該基因的功能分類，所在代謝途徑等；透過NCBI Blastn，BlastX，tBlastn等比對與該基因同源性較高的基因序列和可能功能；透過ExPASY研究蛋白的特點，二級結構，三級結構等。

之後，根據已得到的資訊，依據可能的功能設計細胞分子生物學實驗，例如，1利用已知序列，透過RACE方法獲得該基因的cDNA全序列，透過巢式PCR或者Tail PCR的方法獲得全基因組序列及promotor序列2構建過表達載體，在生物體內過表達該基因，看是否獲得可見表性 3構建反義RNA載體，或者RNAi載體，使該基因的表達沉默，看是否獲得可見表性 4透過同源重組的方法，敲除該基因，看是否獲得可見表性 5在該基因缺失的突變生物體中，過表達該基因，看錶效能夠得到互補t突變 6在該基因啟動子後接上報告基因，觀察該基因的表達位置 7在將該基因與報告基因後，進行亞細胞定位 8採用real-time-PCR的方法，觀察該基因的表達模式 9採用基因晶片的方法，觀察與該基因有關的基因 10採用酵母雙雜交的方法，尋找與該基因相互作用的蛋白。 等等等等