使用者5416510070692021-11-23 09:46:54

不建議使用PCR產物直接連線，因為產物中的Taq Buffer會影響到連線體系中的離子濃度，從而影響連線效率。

PCR純化產物直接連線通常分為兩種情況，

一是TA連線，如phusion，高保真的taq，PCR後會有一個A末端，和T載體的T末端互補相連。

另一是平末端連線，如pfu，PCR後是平末端，可以和blunt II vector這一類的載體直接相連，但順序是隨機的，可能是正的，也可能是反的。